Bone：MACF1通过GSK3β/TCF7通路上调MAP1B促进成骨系细胞迁移

近日，骞爱荣教授团队在国际著名骨科期刊《Bone》在线发表了最新研究成果“MACF1 promotes osteoblastic cell migration via regulating MAP1B throughthe GSK3β/TCF7 pathway”，报道了成骨系细胞迁移对骨形成的作用及骨质疏松发生的新机制[1]。

骨形成是维持骨量和骨骼健康的重要生理过程。该过程由间充质干细胞（MSCs）分化而来的成骨系细胞来完成[2]。在膜内骨化过程中，MSCs首先被募集到骨表面，进行增殖和分化，最终成为成熟的成骨细胞[3]。因此，成骨系细胞迁移是骨形成过程中一个重要的生理过程。成骨系细胞迁移的异常将导致骨骼疾病的发生，例如骨质疏松症和骨折延迟愈合。

微管肌动蛋白交联因子 1 (MACF1) 是血影蛋白家族的成员，通过其F-肌动蛋白和微管蛋白结合域与肌动蛋白和MT结合。MACF1 在众多组织中普遍表达，并在许多生理和病理过程中发挥重要作用[4]。细胞迁移的调节是MACF1最重要的功能之一，该功能由Wu等人于2008年首次报道[5，6]。

在本研究中，作者发现了MACF1缺失抑制成骨系细胞MC3T3-E1和皮质骨来源间充质干细胞(C-MSC）的迁移，并降低细胞微管骨架稳定性（图1）。

  图1. MACF1提高微管骨架稳定性，促进成骨系细胞迁移（原文Fig 1和Fig S1）。

MAP1B在维持微管骨架稳定性和调控细胞迁移方面具有重要的作用。作者发现，在MACF1缺失细胞中，MAP1B的表达量也显著下降；利用siMAP1B转染细胞之后发现，MAP1B基因的沉默显著抑制了成骨系细胞的迁移，细胞微管骨架纤维也变的紊乱，成断裂不连续的状态，这与MACF1缺失细胞的表型非常相似（图2）。

图2 MACF1通过MAP1B调控成骨系细胞迁移和微管骨架稳定性（原文Fig 2和Fig 3）。

MAP1B的1265位酪氨酸可被GSK3β磷酸化，磷酸化的MAP1B（p[T1256]MAP1B）降低微管蛋白α-tubulin的乙酰化水平，降低微管骨架稳定性。作者发现，MACF1缺失上调p[T1256]MAP1B水平，下调乙酰化α-tubulin（Acetyl[K40]α-tbulin）的水平, 降低微管骨架稳定性，最终抑制成骨系细胞迁移（图3）。

图3 MACF1通过GSK3β调控MAP1B磷酸化和成骨系细胞迁移（原文Fig3）。

除此之外，作者发现MACF1缺失导致MAP1B mRNA表达水平下降；利用JASPAR在线软件预测发现转录因子TCF7可以结合MAP1B基因的启动子区DNA序列；利用荧光素酶报告基因和染色质免疫共沉淀技术发现MACF1促进TCF7与MAP1B基因启动子区的结合进而促进MAP1B的表达（图4）。

图4 MACF1通过促进TCF7在MAP1B基因启动子区的结合促进MAP1B mRNA的表达（原文 Fig 4）。

总之以上结果阐明了MACF1在调控成骨系细胞迁移和骨形成中的重要功能和机制，为进一步研究MACF1在骨代谢和骨骼相关疾病的治疗提供了潜在靶点。

(文/图：苏佩红，审核：)

参考文献：

[1] Su P, Ye T, Yin C, et al. MACF1promotes osteoblastic cell migration by regulating MAP1B through theGSK3beta/TCF7 pathway. Bone. 154 (2021), http://doi.org/10.1016/j.bone.2021.116238.

原文链接：https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S875632822100404X?via%3Dihub

[2] Luu HH, Song WX, Luo X, et al.Distinct roles of bone morphogenetic proteins in osteogenic differentiation ofmesenchymal stem cells. Journal of orthopaedic research: official publicationof the Orthopaedic Research Society. 25 (2007) 665-77, https://doi.org/10.1016/j.gendis.2019.03.008.

[3] Su P, Tian Y, Yang C, et al.Mesenchymal Stem Cell Migration during Bone Formation and Bone DiseasesTherapy. Int J Mol Sci. 19 (2018), https://doi.org/10.3390/ijms19082343.

[4]Bernier G, Mathieu M, De Repentigny Y,et al. Cloning and characterization of mouse ACF7, a novel member of thedystonin subfamily of actin binding proteins. Genomics. 38 (1996) 19-29, https://doi.org/10.1006/geno.1996.0587.

[5] Wu X, Kodama A, Fuchs E. ACF7regulates cytoskeletal-focal adhesion dynamics and migration and has ATPaseactivity. Cell. 135 (2008) 137-48, https://doi.org/10.1016/j.cell.2008.07.045.